拉曼光譜技術在血脂異常診斷試驗中的應用
血脂異常通常指由于脂質代謝紊亂而引起血清中血脂成分含量的異常變化,又稱高脂血癥。高脂血癥促進脂質在血管內皮下沉積而形成斑塊,晚期斑塊破裂形成血栓,堵塞冠狀動脈或腦血管造成心肌梗死或腦卒中,是心腦血管**的一個重要危險因素。目前,中國成年人高脂血癥患病率高達40.4%,隨著人群血脂水平的升高,我國心血管病事件在2010—2030年預計增加920萬,所以提高血脂異常的早期檢出率、控制血脂水平對減少心血管病事件的發生至關重要。
拉曼光譜基于分子振動產生,可以反映分子的結構和構象,從分子水平反映組織病理變化,是一種基于分子水平的檢測手段。**的發生與分子蛋白質、脂類、核酸、糖等各種成分的改變相關,而光譜技術是了解這些物質變化*靈敏的技術。通過激光散射獲得拉曼光譜圖譜,根據波峰的位置、強度、譜線的寬度,可獲得這些大分子物質的含量及結構信息。拉曼光譜技術可以探尋血清中與**相關的大分子物質的譜線特征,從分子水平研究與**相關的物質在血清中的濃度變化,從而進行**的診斷。
大多數高脂血癥患者無任何癥狀和異常體征表現,常常是在進行血液生化檢驗時被發現,這并不利于血脂異常的早期發現,而且現有的診斷方法主要靠血常規檢測,此方法雖然普及且簡便,但仍然是一項有創的檢查方法。拉曼光譜具有對樣品破壞程度低、迅速、操作簡便、專一性強等優點。可以作為一種無創、高效的血脂異常篩查方法用于**早期檢查。
惡性腫瘤
惡性腫瘤目前已成為人類健康*大的威脅。由于缺乏高效的癌癥篩查手段,以及對“早發現、早診斷、早**”等**策略認知不足,我國癌癥患者5年生存率僅為30.9%。目前,檢測腫瘤的3種主要方法為腫瘤標志物檢測、影像學診斷和組織病理學診斷,其中組織病理學診斷是腫瘤診斷的“金標準”,但也是一種有創的診斷方式,不僅要求檢測人員具有豐富的經驗,而且診斷時效性差。
拉曼光譜可以在分子水平上揭示腫瘤組織與正常組織結構之間的差異,且不會改變樣品的性狀,故在腫瘤的良惡性判別、腫瘤的亞型分類、切片病理診斷等方面被廣泛應用。腫瘤生物標記物檢測是一種非侵入性的快速分析技術,而且腫瘤標記物濃度低,化學成分復雜,可以利用拉曼光譜技術檢測血清腫瘤標志物成分,以彌補傳統病理活檢的局限性,完成癌癥的早期篩查。
病毒檢測
目前病毒感染的診斷方法有多種,主要為**檢測、核酸檢測、熱成像檢測等。其中核酸檢測是在新型冠狀病毒感染診斷中使用*多,也被世界公認的重要方法。有研究者在拉曼光譜儀的532nm激光光源下檢測健康人、乙型肝炎(以下簡稱乙肝)和丙型肝炎(以下簡稱丙肝)患者血清。與健康人血清相比,峰值在1006、1157、1513cm-1處,乙肝和丙肝患者血清光譜的峰值隨著強度的降低而發生藍移。研究發現乙肝患者血清中的625、678、748、810、820、950、1003、1018、1275cm-1波峰強度高于健康人血清。
乙肝和丙肝患者血清的拉曼光譜譜線波峰及波段與健康人血清光譜差異很大,該技術可被視為診斷乙肝和丙肝的有效工具。亦有研究表明,充分利用表面增強拉曼散射的“指紋圖譜”分析優勢,利用DNA探針將拉曼活性分子與靶核酸連接,通過對DNA探針上拉曼活性分子信號變化的檢測和分析,可提高新型冠狀病毒核酸檢測的靈敏度與特異度。
血糖異常檢測
糖尿病是一種影響全球4.22億人的慢性非傳染性**。目前*先進的血糖監測器也需要患者每天取數次指間血,這種方法不僅有創、不便,而且有感染風險。在不同光學技術中,拉曼光譜是用無創技術診斷***有前景的光學方法之一。
有研究者使用拉曼光譜儀采集12名志愿者微血管血糖的拉曼光譜來預測血糖,結果顯示激光聚焦甲襞微血管獲得的拉曼光譜峰在650、758、837、945、978、1004、1130、1163、1217、1551、1660cm-1處很明顯,且比健康人血清譜峰要高,這些譜峰同樣也存在于血液中。這表明可以使用無創的方法在體表進行臨床范圍可接受的血糖預測,對研究無創血糖檢測具有重要意義,而且這種**的方法還可以促進其他血液成分的非侵入性檢測。
基于拉曼光譜技術對樣品的定性及定量分析
定性和定量分析是拉曼光譜應用于物質分析科學中兩個*重要的方面。不同分子物質有不同特征的拉曼光譜譜線,故可以用于物質分子定性與結構分析。光譜波峰的強度與分子物質濃度成正比,因此可用于物質的定量分析。
拉曼光譜分析法在臨床上可用于對血紅蛋白含氧量的檢測。拉曼光譜分析法可以對樣品進行快速、簡單、可重復、無損傷的定性、定量分析,可以利用拉曼光譜這一特點,對血脂異常患者血清進行各血脂成分的定性及定量分析。
便攜拉曼光譜儀的原理及應用
便攜拉曼光譜儀工作原理與大型拉曼光譜儀的工作原理相似,先是由光譜儀激光器發出一束激光聚焦在被測物體上,然后用探頭收集散射光,并濾去頻率沒有變化的散射光,再利用內置光柵對不同波長的散射光進行分離,*后對光譜進行收集和記錄,并轉換成數字信號后*終輸出,得到拉曼光譜。
為了使用拉曼光譜對人體進行快速、簡單、可重復、無損傷的定性、定量分析,在**方面需要較低的激光功率來保證人體不受損害。目前除了布魯克BRAVO,沒有其他手持式拉曼光譜儀在所有工作模式下被歸類為激光**。因此,使用布魯克BRAVO成了拉曼光譜測量人體的上上之選。
BRUKER手持式拉曼光譜儀——BRAVO:
l 激光**等級1級、操作更**;
l SSE–連續移頻激發 (**)、有效去除熒光;
l Duo LASER 雙激發波長、擴展到C-H的測量區域;
l IntelliTip -自動識別智能測試頭、滿足固體和液體樣品;
l 內置式波數校正技術,確保波數的長期穩定性;
l 直觀的、向導式觸屏操作,與智能手機類似,可自動批量掃描報告;
l BRUKER 德國品質的穩定、**的光學系統;
l 符合21 CFR part 11認證要求。