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杜馬斯定氮測定飼料中的蛋白質
杜馬斯定氮法(DumasMethod)在測定蛋白質時,實際上是通過測定樣品中的氮含量來間接計算蛋白質的含量,因為蛋白質是由氨基酸組成的,而氨基酸都含有氮元素。這種方法基于氮元素在高溫燃燒條件下轉化為氮氣(N?)的原理,隨后通過檢測生成的氮氣量來確定氮元素的含量,并*終計算出蛋白質的含量。
1.樣品準備:
將待測飼料樣品進行適當?shù)那疤幚?,如研磨成細粉、干燥至恒重等,以確保樣品均勻且易于燃燒。
2.燃燒分析:
將處理好的樣品置于杜馬斯定氮儀的燃燒管中,在純氧或富氧環(huán)境中進行高溫燃燒(通常溫度超過1000°C)。
燃燒過程中,樣品中的有機物質(包括蛋白質)被氧化分解,氮元素以氮氣(N?)的形式釋放出來。
3.氣體分離與檢測:
燃燒產(chǎn)生的混合氣體(包括氮氣、二氧化碳、水蒸氣等)通過一系列的氣體分離裝置,如冷卻管、干燥劑等,以去除干擾氣體(如二氧化碳和水蒸氣)。
純凈的氮氣隨后被引入檢測器(如熱導檢測器TCD或質譜儀MS)中進行定量分析。
4.氮含量計算:
根據(jù)檢測器測得的氮氣量,結合儀器的校準曲線或計算公式,可以計算出樣品中氮元素的含量。
蛋白質含量計算:
利用氮含量和蛋白質的平均含氮量(通常為6.25%,這是一個基于常見蛋白質的近似值)之間的關系,計算出樣品中的蛋白質含量。
計算公式為:蛋白質含量(%)=氮含量(%)×6.25。
注意事項:
1.樣品的前處理對測定結果有很大影響,必須確保樣品均勻且完全燃燒。
2.燃燒過程中需要嚴格控制溫度和氧氣流量,以確保氮元素完全轉化為氮氣。
3.氣體凈化步驟非常關鍵,必須徹底去除干擾物質,以避免對測定結果產(chǎn)生誤差。
4.測定過程中應使用標準物質進行校準,以確保測定結果的準確性。
5.杜馬斯定氮法具有操作簡便、快速、準確等優(yōu)點,因此在飼料、食品、化肥等領域得到了廣泛應用
需要注意的是,雖然杜馬斯定氮法是一種廣泛應用的蛋白質測定方法,但它也存在一定的局限性。例如,它無法區(qū)分樣品中的蛋白質氮和非蛋白質氮(如硝酸鹽、亞硝酸鹽中的氮),因此在某些情況下可能會導致蛋白質含量的高估或低估。此外,不同的蛋白質其含氮量也可能有所不同,因此在實際應用中可能需要根據(jù)具體情況對平均含氮量進行適當調整。
意大利VELP杜馬斯元素分析儀的優(yōu)勢:
1.雙載氣系統(tǒng),可選擇氦氣和氬氣作為載氣,無縫選擇氬氣,可以降低與氦氣相關的成本。2.可在無參考氣體的情況下工作,確保了準確性和**度。
2.儀器由DUM SoftTM軟件驅動,只需3-4分鐘就能產(chǎn)生N/蛋白質結果,完全不需要值守,并且支持云計算。3.可以同時裝載不同基質的固體、半固體和液體樣品。4.市場上*低的氦氣LOD為0.001mgN,RSD低于0.5%(EDTA),保證了高精度的結果和出色的重復性。5.免維護的DriStepTM疏水閥是一種物理性的疏水閥,可以去除99%的水,減少了化學品的成本。
6.NDA702易于安裝,結構極為緊湊,可節(jié)省實驗室寶貴的工作臺空間。與濕化學N/蛋白質測定方法相比,VELP Duma定氮技術極大地減少了浪費。